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問答題
【簡答題】RNA與基因組 DNA復(fù)性已被廣泛用于檢測(cè)不同類 DNA的轉(zhuǎn)錄。DNA驅(qū)動(dòng)的復(fù)性實(shí)驗(yàn)與RNA驅(qū)動(dòng)的復(fù)性實(shí)驗(yàn)有何不同？
答案：在過量DNA雜交(DNA驅(qū)動(dòng)雜交)實(shí)驗(yàn)中，基因組 DNA的復(fù)性過程中加入少量的放射性標(biāo)記 RNA。因...
問答題
【簡答題】嚴(yán)緊雜交實(shí)驗(yàn)是如何控制的？
答案：雜交反應(yīng)的嚴(yán)緊程度由下面兩個(gè)因素所決定：溫度和鹽濃度。強(qiáng)的堿基對(duì)才能耐受高的溫度，而高的鹽濃度使弱的堿基對(duì)間的配對(duì)變得穩(wěn)...
問答題
【簡答題】用一限制性內(nèi)切核酸酶切割 Lac⁺Tet^r的質(zhì)粒載體，已知該酶識(shí)別的是4個(gè)堿基序列，并產(chǎn)生有兩個(gè)堿基突出的單鏈末端，該酶在 lac 基因內(nèi)有切割位點(diǎn)，并在第二個(gè)氨基酸密碼子內(nèi)，該位點(diǎn)可以被任何氨基酸所取代而不影響酶活性。用該酶切割后，用 DNA聚合酶將單鏈末端補(bǔ)齊為雙鏈的平末端，然后重新連接成環(huán)，轉(zhuǎn)化 Lac-Tet^s受體菌，篩選 Tet 轉(zhuǎn)化子，問：Lac^r的基因型是什么？并說明原因。
答案：基因型是lac- 原因是在該密碼子中插入了兩個(gè)堿基，造成了移碼突變，所以Lac的基因是缺陷的。
問答題
【簡答題】什么是Western 印跡？它與 Southern 印跡有什么不同？
答案：Western印跡是將蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離后從凝膠中轉(zhuǎn)移到固相支持物上,然后用特異性的抗體進(jìn)行檢測(cè)。它與Southern的不...
問答題
【簡答題】用 EcoRI和 HindⅢ分別切割同一來源的染色體 DNA，并進(jìn)行克隆，在前者的克隆中篩選到 A基因，但在后者的克隆中未篩選到 A基因，請(qǐng)說明原因。
答案：原因是：HindⅢ的切點(diǎn)在 A基因內(nèi)。
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【簡答題】一個(gè)攜帶有氨芐和卡那霉素抗性基因的質(zhì)粒被僅在卡那霉素基因中有識(shí)別位點(diǎn)的EcoRI消化。消化物與酵母 DNA 連接后轉(zhuǎn)化對(duì)兩種抗生素都敏感的 E.coli 菌株。（1）利用哪一種抗生素抗性選擇接受了質(zhì)粒的細(xì)胞？（2）怎樣區(qū)分接受了插入酵母 DNA的質(zhì)粒的克隆？
答案：
（1）選擇Amp^r的轉(zhuǎn)化子；
（2）所需的克隆是Amp^r和Kan^r。任何能夠抗這兩種藥物的克隆都是自連的非重組質(zhì)粒。
問答題
【簡答題】插入失活和插入表達(dá)法篩選重組體的主要差別是什么？
答案：主要差別是：插入失活法是直接根據(jù)失活基因的表型變化來篩選重組體；插入表達(dá)是根據(jù)一個(gè)基因的失活引起另一個(gè)基因的表達(dá)表型來選...
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【簡答題】切口移位（nick translation）標(biāo)記探針的主要步驟有哪些？
答案：（1）DNaseI造成切口；
（2）DNA聚合酶Ⅲ的 5’3’外切核酸酶進(jìn)行切割；
問答題
【簡答題】你在做Southern 印跡分析，并且剛完成了凝膠電泳這一步。根據(jù)方案，下面一步驟是用 NaOH溶液浸泡凝膠，使 DNA變性為單鏈。為了節(jié)省時(shí)間，你略過了這一步，直接將DNA從凝膠轉(zhuǎn)至硝酸纖維素膜上。然后用標(biāo)記探針雜交，最后發(fā)現(xiàn)放射自顯影片是空白。錯(cuò)在哪里？
答案：如果你的雜交探針是雙鏈的，可能因?yàn)樵诩尤腚s交混合物之前忘記將探針變性而得到空白的放射自顯影結(jié)果。
問答題
【簡答題】點(diǎn)印跡與Southern 印跡相比，有何優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)？
答案：兩種技術(shù)都可用于分析混合 DNA樣品中是否存在能與特定探針雜交的序列。點(diǎn)雜交比 Southern&#...

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【簡答題】在基因工程中，為了在細(xì)菌細(xì)胞中表達(dá)真核生物的基因產(chǎn)物，為什么通常要用 cDNA而不用基因組 DNA？為什么要在cDNA 前加上細(xì)菌的啟動(dòng)子？

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【簡答題】用 EcoRI和 HindⅢ分別切割同一來源的染色體 DNA，并進(jìn)行克隆，在前者的克隆中篩選到 A基因，但在后者的克隆中未篩選到 A基因，請(qǐng)說明原因。

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【簡答題】點(diǎn)印跡與Southern 印跡相比，有何優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)？

【簡答題】在基因工程中，為了在細(xì)菌細(xì)胞中表達(dá)真核生物的基因產(chǎn)物，為什么通常要用 cDNA而不用基因組 DNA？為什么要在cDNA 前加上細(xì)菌的啟動(dòng)子？

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【簡答題】用 EcoRI和 HindⅢ分別切割同一來源的染色體 DNA，并進(jìn)行克隆，在前者的克隆中篩選到 A基因，但在后者的克隆中未篩選到 A基因，請(qǐng)說明原因。

【簡答題】插入失活和插入表達(dá)法篩選重組體的主要差別是什么？

【簡答題】切口移位（nick translation）標(biāo)記探針的主要步驟有哪些？

【簡答題】點(diǎn)印跡與Southern 印跡相比，有何優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)？

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