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問答題RNA與基因組 DNA復(fù)性已被廣泛用于檢測不同類 DNA的轉(zhuǎn)錄。DNA驅(qū)動(dòng)的復(fù)性實(shí)驗(yàn)與RNA驅(qū)動(dòng)的復(fù)性實(shí)驗(yàn)有何不同？

參考答案： 在過量DNA雜交(DNA驅(qū)動(dòng)雜交)實(shí)驗(yàn)中，基因組 DNA的復(fù)性過程中加入少量的放射性標(biāo)記 RNA。因...

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1.問答題嚴(yán)緊雜交實(shí)驗(yàn)是如何控制的？

參考答案：雜交反應(yīng)的嚴(yán)緊程度由下面兩個(gè)因素所決定：溫度和鹽濃度。強(qiáng)的堿基對才能耐受高的溫度，而高的鹽濃度使弱的堿基對間的配對變得穩(wěn)...

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2.問答題用一限制性內(nèi)切核酸酶切割 Lac⁺Tet^r的質(zhì)粒載體，已知該酶識別的是4個(gè)堿基序列，并產(chǎn)生有兩個(gè)堿基突出的單鏈末端，該酶在 lac 基因內(nèi)有切割位點(diǎn)，并在第二個(gè)氨基酸密碼子內(nèi)，該位點(diǎn)可以被任何氨基酸所取代而不影響酶活性。用該酶切割后，用 DNA聚合酶將單鏈末端補(bǔ)齊為雙鏈的平末端，然后重新連接成環(huán)，轉(zhuǎn)化 Lac-Tet^s受體菌，篩選 Tet 轉(zhuǎn)化子，問：Lac^r的基因型是什么？并說明原因。

參考答案：基因型是lac- 原因是在該密碼子中插入了兩個(gè)堿基，造成了移碼突變，所以Lac的基因是缺陷的。

3.問答題什么是Western 印跡？它與 Southern 印跡有什么不同？

參考答案：Western印跡是將蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離后從凝膠中轉(zhuǎn)移到固相支持物上,然后用特異性的抗體進(jìn)行檢測。它與Southern的不...

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4.問答題用 EcoRI和 HindⅢ分別切割同一來源的染色體 DNA，并進(jìn)行克隆，在前者的克隆中篩選到 A基因，但在后者的克隆中未篩選到 A基因，請說明原因。

參考答案：原因是：HindⅢ的切點(diǎn)在 A基因內(nèi)。

5.問答題一個(gè)攜帶有氨芐和卡那霉素抗性基因的質(zhì)粒被僅在卡那霉素基因中有識別位點(diǎn)的EcoRI消化。消化物與酵母 DNA 連接后轉(zhuǎn)化對兩種抗生素都敏感的 E.coli 菌株。（1）利用哪一種抗生素抗性選擇接受了質(zhì)粒的細(xì)胞？（2）怎樣區(qū)分接受了插入酵母 DNA的質(zhì)粒的克??？

參考答案：

（1）選擇Amp^r的轉(zhuǎn)化子；
（2）所需的克隆是Amp^r和Kan^r。任何能夠抗這兩種藥物的克隆都是自連的非重組質(zhì)粒。

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