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問答題
【簡答題】Ⅲ類限制酶有哪些特點?
答案:
Ⅲ類酶是基因工程中不常用的酶,分子量和亞基組成類似于 I類酶,作用方式基本同Ⅱ類酶。如 EcoPI是由兩個亞基組成,一個...
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問答題
【簡答題】I類限制酶具有哪些特點?在基因工程中有什么作用?
答案:
I類限制性內(nèi)切核酸酶的分子量較大,一般在 30 萬道爾頓以上,通常由三個不同的亞基所組成。例如限制性內(nèi)切核酸酶 EcoB...
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【簡答題】細菌的限制—修飾系統(tǒng)有什么意義?
答案:
不同種的細菌或不同的細菌菌株具有不同的限制酶和修飾酶組成的限制與修飾系統(tǒng)。修飾的本質(zhì)是通過甲基化酶將DNA中某些堿基進行...
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問答題
【簡答題】什么是細菌的限制—修飾系統(tǒng)?(restriction-modificationsystem,R-Msystem)
答案:
細菌中有作用于同一DNA的兩種酶,即分解 DNA 的限制酶和改變DNA堿基結(jié)構(gòu)使其免遭限制酶分解的修...
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問答題
【簡答題】用 Klenow 酶填補的辦法可使 5’黏性末端轉(zhuǎn)變成平末端。這種方法常使 DNA 上的某些限制酶的識別位點消失。請問,對于下列限制酶,用這種方法處理會不會使它們的識別序列都消失?BamH I(G↓GATCC); Taq I(T↓CGA),BssHⅡ(G↓CGCGC)。
答案:
用這種方法處理BssHⅡ不會消失。
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【簡答題】用連接酶將 Sau 3AI(,bGATC)切割的 DNA與經(jīng) BamHI(G↓’GATCC)切割的 DNA連接起來后,能夠被 BamHI 切割的機率有多大(用百分比表示)?
答案:
能夠被 BamHI 切割的機率有25%。
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【簡答題】下面幾種序列中你認為哪一個(哪些)最有可能是Ⅱ類酶的識別序列:GAATCG,AAATTT, GATATC,ACGGCA?為什么?
答案:
(1) GATATC;AAATUF;
(2)因為它們是回文序列。
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【簡答題】在序列 5’—CGAACATATGGAGT-3’中含有一個 6bp 的Ⅱ類限制性內(nèi)切核酸酶的識別序列,該位點的序列可能是什么?
答案:
回文序列是:5’-CATATG-3’。
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【簡答題】某學(xué)生在用 EcoRI切割外源 DNA片段時,出現(xiàn)了星號活性,請分析可能的原因?
答案:
鹽離子濃度不對,溫度不對,甘油濃度過高。
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【簡答題】有些噬菌體和質(zhì)粒常常編碼一些抗限制性酶的蛋白以中和宿主的限制系統(tǒng)。你認為噬菌體和質(zhì)粒還有哪些可能的方式避免宿主的限制作用?
答案:
某些噬菌體的基因組中有修飾的堿基,因此對限制性內(nèi)切核酸酶具有免疫作用。另一種避免限制酶切割的途徑是抑制 SAM...
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【簡答題】Fredrick 和 McClarin等用一個由 13 個堿基對的 DNA片段與 EcoRI、反應(yīng),然后分離到酶和 DNA 共結(jié)晶的復(fù)合物,通過 X射線分析發(fā)現(xiàn)了什么?
答案:
發(fā)現(xiàn):具有活性的 EcoRI是一個二聚體,它們同 DNA結(jié)合形成一個直徑為 50A 的球形結(jié)構(gòu),兩個 EcoRI位于 ...
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