基因克隆是對分離出來的目的基因進(jìn)行大量擴(kuò)增的過程。經(jīng)過基因克隆,可以生產(chǎn)出大量的目的基因或在基因表達(dá)時獲得大量的蛋白質(zhì)。細(xì)菌質(zhì)粒是基因克隆的合適載體,經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),某些細(xì)菌質(zhì)粒中含有兩個抗生素抗性基因——氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因,而且,在四環(huán)素抗性基因中存在限制酶的單一識別序列。
下圖表示利用質(zhì)粒進(jìn)行基因克隆的過程,其中A-D表示物質(zhì),I和II表示抗性基因,①—⑦表示過程,其它數(shù)字表示菌落,據(jù)圖回答下列問題:
將A和B形成D所需的酶是()。⑤過程中為提高成功率,常用()溶液處理大腸桿菌。
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被①處理后的分散細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),通常要在培養(yǎng)液中添加一定量的(),此外應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,以便保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌無毒的環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)。
④階段是否可使用不添加植物激素的培養(yǎng)基?理由是什么?
普通番茄細(xì)胞導(dǎo)入目的基因后,先要接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng),經(jīng)脫分化過程后得到愈傷組織,然后再轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上,誘導(dǎo)出試管苗,然后進(jìn)一步培養(yǎng)成正常植株。獲得的轉(zhuǎn)基因植物經(jīng)有性生殖獲得的后代,是否也具有轉(zhuǎn)基因特性?
“分子運輸車”是()。
利用基因工程進(jìn)行育種,可以培育出具有新性狀的植株,這種育種方式的優(yōu)點是:①();②()。
操作步驟:從人的()獲取目的基因;目的基因與()結(jié)合構(gòu)建基因表達(dá)載體;在基因表達(dá)載體中還應(yīng)插入()和終止子。然后把基因表達(dá)載體導(dǎo)入牛的(),通過發(fā)育形成的牛體細(xì)胞含人的(),成熟的牛產(chǎn)的的奶中含有(),證明基因操作成功。
在獲得目的基因的過程中,PCR技術(shù)相當(dāng)重要。PCR擴(kuò)增反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中加入DNA模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種()、四種脫氧核苷酸和()的DNA聚合酶。
基因工程操作的基本步驟是:①();②();③();④()。
②、③階段是否可使用同種培養(yǎng)基?理由是什么?
仔鼠出生后可用其尾巴進(jìn)行DNA檢測,通過()方法,檢測出攜帶外源基因的小鼠。至于外源基因是否合成相應(yīng)的蛋白質(zhì),可從轉(zhuǎn)基因小鼠中提取蛋白質(zhì),并用相應(yīng)的抗體進(jìn)行()雜交,若有雜交帶出現(xiàn),則表明小鼠體內(nèi)的外源基因()。