圖中①一般經(jīng)（）處理可以得到③，從③到④的過(guò)程中涉及到的生物技術(shù)有（）和（）。

操作步驟：從人的（）獲取目的基因；目的基因與（）結(jié)合構(gòu)建基因表達(dá)載體；在基因表達(dá)載體中還應(yīng)插入（）和終止子。然后把基因表達(dá)載體導(dǎo)入牛的（），通過(guò)發(fā)育形成的牛體細(xì)胞含人的（），成熟的牛產(chǎn)的的奶中含有（），證明基因操作成功。

④階段是否可使用不添加植物激素的培養(yǎng)基？理由是什么？

普通番茄細(xì)胞導(dǎo)入目的基因后，先要接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，經(jīng)脫分化過(guò)程后得到愈傷組織，然后再轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)出試管苗，然后進(jìn)一步培養(yǎng)成正常植株。獲得的轉(zhuǎn)基因植物經(jīng)有性生殖獲得的后代，是否也具有轉(zhuǎn)基因特性？

在獲得目的基因的過(guò)程中，PCR技術(shù)相當(dāng)重要。PCR擴(kuò)增反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中加入DNA模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種（）、四種脫氧核苷酸和（）的DNA聚合酶。

被①處理后的分散細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，通常要在培養(yǎng)液中添加一定量的（），此外應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)。

若要獲得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ對(duì)圖中對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)進(jìn)行切割？說(shuō)明理由。要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割質(zhì)粒？

仔鼠出生后可用其尾巴進(jìn)行DNA檢測(cè)，通過(guò)（）方法，檢測(cè)出攜帶外源基因的小鼠。至于外源基因是否合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，可從轉(zhuǎn)基因小鼠中提取蛋白質(zhì)，并用相應(yīng)的抗體進(jìn)行（）雜交，若有雜交帶出現(xiàn)，則表明小鼠體內(nèi)的外源基因（）。

圖中的III是導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)、篩選最終獲得一株有抗蟲特性的轉(zhuǎn)基因植株。經(jīng)分析，該植株含有一個(gè)攜帶目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是雜合子。理論上，在該轉(zhuǎn)基因植株自交產(chǎn)生的F1中，仍具有抗蟲特性的植株占總數(shù)的（），原因是（）。

人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá)，說(shuō)明人和牛（）。