在獲得目的基因的過程中，PCR技術相當重要。PCR擴增反應需要在一定的緩沖溶液中加入DNA模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種（）、四種脫氧核苷酸和（）的DNA聚合酶。

此基因與細菌的質(zhì)粒相結(jié)合要依靠（）酶和（）酶，其作用部位是磷酸二酯鍵，然后將目的基因移植到酵母菌體內(nèi)，酵母菌在基因工程中叫（）。

被①處理后的分散細胞進行培養(yǎng)，通常要在培養(yǎng)液中添加一定量的（），此外應定期更換培養(yǎng)液，以便保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌無毒的環(huán)境中進行培養(yǎng)。

仔鼠出生后可用其尾巴進行DNA檢測，通過（）方法，檢測出攜帶外源基因的小鼠。至于外源基因是否合成相應的蛋白質(zhì)，可從轉(zhuǎn)基因小鼠中提取蛋白質(zhì)，并用相應的抗體進行（）雜交，若有雜交帶出現(xiàn)，則表明小鼠體內(nèi)的外源基因（）。

導入細菌B細胞的目的基因成功表達的標志是什么？

②、③階段是否可使用同種培養(yǎng)基？理由是什么？

若研究發(fā)現(xiàn)羊N細胞中線粒體發(fā)達，故而它的產(chǎn)奶率高，則小羊a會有這一優(yōu)良性狀嗎？你的依據(jù)是什么？

圖中涉及的現(xiàn)代生物技術有（）（至少寫三種）。

操作步驟：從人的（）獲取目的基因；目的基因與（）結(jié)合構(gòu)建基因表達載體；在基因表達載體中還應插入（）和終止子。然后把基因表達載體導入牛的（），通過發(fā)育形成的牛體細胞含人的（），成熟的牛產(chǎn)的的奶中含有（），證明基因操作成功。

④階段是否可使用不添加植物激素的培養(yǎng)基？理由是什么？